IPTG CAS:367-93-1 Gyártói ár
Az izopropil-β-D-1-tiogalaktopiranozid (IPTG) a laktóz szintetikus analógja, amelyet általában molekuláris biológiai kutatásokban és biotechnológiai alkalmazásokban használnak.Az IPTG-t elsősorban gének expressziójának indukálására használják bakteriális rendszerekben, ahol molekuláris triggerként szolgál a célgének transzkripciójának elindításához.
Ha a táptalajhoz adjuk, az IPTG-t felveszik a baktériumok, és kötődni tud a lac-represszor fehérjéhez, megakadályozva, hogy az blokkolja a lac operon aktivitását.A lac operon a laktóz anyagcserében részt vevő gének csoportja, és amikor a represszor fehérjét eltávolítják, a gének expresszálódnak.
Az IPTG-t gyakran használják a lacUV5 mutáns promoterrel együtt, amely a lac promoter konstitutívan aktív változata.Az IPTG indukció és a mutáns promoter kombinálásával a kutatók magas szintű génexpressziót érhetnek el.Ez lehetővé teszi nagy mennyiségű fehérje előállítását tisztításhoz vagy más, későbbi alkalmazásokhoz.
A génexpresszió mellett az IPTG-t gyakran használják kék/fehér szűrési vizsgálatokban is.Ebben a technikában a lacZ gént jellemzően egy érdeklődésre számot tartó génnel fuzionálják, és a baktériumok, amelyek sikeresen expresszálják ezt a fúziós gént, aktív β-galaktozidáz enzimet termelnek.Ha az IPTG-t kromogén szubsztráttal, például X-gal-lal együtt adják hozzá, a fúziós gént expresszáló baktériumok kék színűvé válnak a β-galaktozidáz aktivitása miatt.Ez lehetővé teszi azon rekombináns törzsek azonosítását és szelekcióját, amelyek sikeresen integrálták a kérdéses gént.
Génexpresszió indukálása: Az IPTG-t általában a célgének expressziójának indukálására használják bakteriális rendszerekben.Utánozza a természetes induktor laktózt, és kötődik a lac represszor fehérjéhez, megakadályozva, hogy blokkolja a lac operont.Ez lehetővé teszi a kívánt gének transzkripcióját és expresszióját.
Fehérje expressziója és tisztítása: Az IPTG indukciót gyakran használják nagy mennyiségű rekombináns fehérjék előállítására különféle célokra, például biokémiai vizsgálatokra, terápiás termelésre vagy szerkezeti elemzésre.Megfelelő expressziós vektorok és IPTG indukció használatával a kutatók magas szintű célfehérje termelést érhetnek el bakteriális gazdaszervezetekben.
Kék/fehér szűrés: Az IPTG-t gyakran használják a lacZ génnel és egy kromogén szubsztráttal, például X-gal-al kombinálva kék/fehér szűrési vizsgálatokhoz.A lacZ gén jellemzően a kérdéses génhez van fuzionálva, és azok a baktériumok, amelyek sikeresen expresszálják ezt a fúziós gént, aktív β-galaktozidáz enzimet termelnek.Az IPTG és a kromogén szubsztrát hozzáadásakor a fúziós gént expresszáló rekombináns törzsek kék színűvé válnak, ami lehetővé teszi az egyszerű azonosítást és szelekciót.
A génszabályozás tanulmányozása: Az IPTG indukciót általában a gének és operonok, különösen a lac operon szabályozásának tanulmányozására használják.Az IPTG koncentrációjának manipulálásával és a lac operon komponensek expressziójának monitorozásával a kutatók vizsgálhatják a génszabályozás mechanizmusait és a különböző tényezők vagy mutációk szerepét.
Génexpressziós rendszerek: Az IPTG számos génexpressziós rendszer, például a T7 promoter alapú rendszerek kulcsfontosságú összetevője.Ezekben a rendszerekben a lac-promotert gyakran használják a T7 RNS-polimeráz expressziójának irányítására, amely viszont átírja a célgéneket a T7-promóterszekvenciák szabályozása alatt.Az IPTG-t a T7 RNS polimeráz expressziójának indukálására használják, ami a célgén expressziójának aktiválásához vezet.
| Fogalmazás | C9H18O5S |
| Próba | 99% |
| Kinézet | fehér por |
| CAS-szám | 367-93-1 |
| Csomagolás | Kicsi és tömeges |
| Szavatossági idő | 2 év |
| Tárolás | Tárolja hűvös és száraz helyen |
| Tanúsítvány | ISO. |
