Fenilgalaktozid CAS:2818-58-8

Az enzimaktivitásra gyakorolt ​​hatás: A fenil-galaktozidot általában a β-galaktozidáz enzim aktivitásának mérésére használják.Amikor a fenil-galaktozidot a β-galaktozidáz hidrolizálja, p-nitrofenol szabadul fel.A p-nitrofenol felhalmozódása kvantitatívan mérhető, betekintést nyújtva a β-galaktozidáz aktivitásába.Ezt a hatást olyan alkalmazásokban hasznosítják, mint az enzimes vizsgálatok és szűrőrendszerek.

Génexpressziós elemzés: A fenil-galaktozidot gyakran használják szubsztrátként molekuláris biológiai kísérletekben a génexpresszió tanulmányozására.A β-galaktozidázt kódoló lacZ gént általában fuzionálják más érdekes gének szabályozó szekvenciáival.A lacZ gén expressziója és a fenil-galaktozid β-galaktozidáz általi hidrolízise jelezheti a vizsgált célgén expressziós mintázatát és szintjét.

Szűrőrendszerek: A fenil-galaktozid a β-galaktozidáz aktivitást hasznosító szűrőrendszerek fontos összetevője.Az egyik széles körben ismert példa a kék-fehér szűrési módszer, amelyet rekombináns vagy transzformált sejtek azonosítására használnak molekuláris biológiai kísérletekben.Azok a telepek, amelyek sikeresen felvették a rekombináns DNS-t vagy genetikai rekombináción estek át, β-galaktozidázt expresszálnak, ami a fenil-galaktozid hidrolíziséhez és kék szín kialakulásához vezet.

Fehérjetisztítás: Egyes esetekben a fenil-galaktozid ligandumként használható affinitáskromatográfiához a β-galaktozidázhoz specifikusan kötődő vagy az általa aktivált fehérjék tisztítására.A kérdéses fehérje tartalmazhat egy affinitástoldalékot vagy egy β-galaktozidáz-kötő domént tartalmazó fúziós címkét.A fehérjekeveréket immobilizált fenil-galaktoziddal ellátott oszlopon átvezetve a kívánt fehérje szelektíven megtartható, majd eluálható.